為了表明小編不是標(biāo)題黨,我們先來(lái)看這篇2015年5月發(fā)表在Translational Stroke Research上的文章所有的數(shù)據(jù):
沒(méi)錯(cuò),不要懷疑你的眼睛,你沒(méi)有看錯(cuò)!除了一張臨床病人樣本選取的表格以外,只有一張圖!只有一張圖哦!哎呦,不錯(cuò)呦……
不過(guò),小編還是承認(rèn),小編是標(biāo)題黨……因?yàn)檫@篇文章只有4.503分,差一點(diǎn)沒(méi)有到5分……
下面小編就和各位老師一起分析一下為什么如此簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)能發(fā)表還不錯(cuò)的文章。
背景:
臨床上對(duì)于腦溢血(intracerebral hemorrhage,ICH)和缺血性卒中(ischemic stroke,IS)的病人,當(dāng)病人情況比較危急無(wú)法進(jìn)行影像學(xué)檢查時(shí),是很難進(jìn)行區(qū)分的。因此,準(zhǔn)確、便宜、快速的血檢是對(duì)于臨床檢測(cè)的有效補(bǔ)充。
已有文章報(bào)道了卒中病人血液轉(zhuǎn)錄組表達(dá)量的變化可以作為臨床檢測(cè)的biomarker,并進(jìn)一步闡述了卒中病人血液轉(zhuǎn)錄組調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的機(jī)制,但不同剪切本在卒中病人中的情況并不清楚。
材料與方法:
材料:為了更精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),本文只選取了白人男性。心源性腦卒中(Cardioembolic IS)、大血管卒中(large vessel)、腔隙性卒中(lacunar)、腦溢血(ICH)病人及正常人對(duì)照組各4例,共20例。(上文結(jié)果中的Table所示)
方法:轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,只關(guān)注不同剪切本。
結(jié)果:
1、412個(gè)基因在五組病人/對(duì)照組全血樣品轉(zhuǎn)錄組中存在不同的剪切本(differential alternative splicing,DAS),這些基因參與了細(xì)胞免疫、細(xì)胞因子、細(xì)胞死亡、存活等信號(hào)通路。
2、由于不同剪切本主要是在剪切過(guò)程中選擇不同外顯子造成的,進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),292個(gè)基因的308個(gè)外顯子在五組病人/對(duì)照組中的表達(dá)量存在差異。
3、根據(jù)不同外顯子的表達(dá)情況,可將五組病人/對(duì)照組劃分開(kāi):(如上文結(jié)果中圖所示)
心源性腦卒中(Cardioembolic IS)相關(guān)剪切本集中在離子結(jié)合/轉(zhuǎn)運(yùn)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)通路中;
大血管卒中(large vessel)相關(guān)剪切本集中在細(xì)胞死亡、轉(zhuǎn)錄、核染色質(zhì)重塑通路中;
腔隙性卒中(lacunar)相關(guān)剪切本集中在細(xì)胞應(yīng)激、循環(huán)、死亡、生存通路中;
腦溢血(ICH)病人相關(guān)剪切本集中在蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)和定位通路中。
研究思路擴(kuò)展:
1、卒中病人的三種不同亞型研究,其實(shí)可類推之其它任意疾病的不同臨床表現(xiàn),如同一癌種的不同亞型。
2、本文能發(fā)表高分文章的主要原因是臨床意義,在急性病人無(wú)法影像學(xué)檢測(cè)的情況下,可以使用血檢來(lái)進(jìn)行輔助診斷。也就是說(shuō)無(wú)論各位老師要開(kāi)展什么樣的臨床病人科研項(xiàng)目,必須是臨床有表型差異的病人,做出結(jié)果后,也要回歸臨床,解釋臨床問(wèn)題。
3、本文只是關(guān)注了不同剪切本的表達(dá)差異,但轉(zhuǎn)錄組測(cè)序在檢測(cè)mRNA表達(dá)量的同時(shí),可進(jìn)一步挖掘可變剪切(如新轉(zhuǎn)錄本的發(fā)現(xiàn)、低豐度轉(zhuǎn)錄本檢測(cè)、新的剪切方式等)、融合基因、外顯子區(qū)域的突變(SNV)等信息,為各位老師的科研提供更多可挖掘的數(shù)據(jù)和創(chuàng)新點(diǎn),也就是說(shuō)一次轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以分開(kāi)發(fā)表若干篇文章!
4、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序在檢測(cè)mRNA表達(dá)量的同時(shí),也檢測(cè)到了發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的ceRNA(lncRNA、circRNA),再加上miRNA測(cè)序,就能進(jìn)一步挖掘調(diào)控網(wǎng)絡(luò),通過(guò)幾個(gè)簡(jiǎn)單的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),闡明mRNA表達(dá)量改變的機(jī)理,那么文章的影響因子自然就會(huì)更上一層樓!
參考文獻(xiàn):
Dykstra-Aiello C, Jickling G C, Ander B P, et al. Intracerebral hemorrhage and ischemic stroke of different etiologies have distinct alternatively spliced mRNA profiles in the blood: a pilot RNA-Seq study[J]. Translational stroke research, 2015, 6(4): 284-289.